1.皮下注射、肌内注射、静脉滴注一些静脉滴注的药物，如各种氨基酸、水解蛋白等与本品合用时可改为皮下注射或肌内注射，使吸收加快。将本品粉末溶于生理盐水中，常用量50U或150U，配成每毫升含0.7、1.5或2U的注射液，事先注射于灌注部位。皮下注射大量的某些抗生素(如链霉素)或其他化疗药物(如异烟肼等)以及麦角制剂时，合用本品，可使扩散加速，减轻痛感。用法同上。以本品150U溶解于25ｖ50ml局部麻醉药中，再加入肾上腺素，可加速麻醉，减少麻醉药的用量。与胰岛素合用，可防止注射局部浓度过高而出现的脂肪组织萎缩。胰岛素休克疗法中用本品100ｖ150U，促使胰岛素吸收量增加，注射较小量即可达血中有效浓度，因而减少其危险性。
2.皮下输注：在需要由皮下注入较大量输液或药液时，特别是婴儿或小儿在作静脉穿刺有困难时，在1000ml液体中加入150U透明质酸酶，即可以10ml/min的速度进行皮下输注。药液将迅速吸收而不发生局部胀痛。
3.外用：促进外伤或手术后水肿或血肿的吸收，可用本品加生理盐水(1ｖ2U/ml)局部浸润。滴眼每次1ｖ2滴，每天4ｖ5次。
